«اطلاعات اين سايت، قديمی و غيرقابل استناد بوده و صرفا به عنوان آرشيو نگهداری می‌شود.»
   [صفحه اصلی ]   [ English ]  
:: مشاهده مقالات ::
:: - ۱۳۸۵/۱۰/۱۱ - جلد:۱۰ - شماره:۱ - 2007/01/1 - Volume:۱۰ - Number:۱ ::
زبان مقاله منتشر شده
عنوان انگلیسی Development of Visual DNA Chip to Detect Human Immunodeficiency Virus type 1 Infection
عنوان فارسی طراحی و استفاده از روش Visual DNA Chip برای تشخیص عفونت ویروس نقص ایمنی اکتسابی (HIV-۱)
عنوان مختصر
کد مقاله (doi)
موضوعات مقاله منتشر شده
نوع مقاله منتشر شده
چکیده انگلیسی مقاله Objectives: Human Immunodeficiency Virus type 1 is the causative agent of Acquired Immunodeficiency syndrome “AIDS” in human and demonstration of HIV-1 genome in samples is accepted as evidence of infection. Transmission of Infection during window period in blood transfusion settings is a world wide concern. Also there is a need for a rapid, sensitive and accurate technique to detect HIV-1 infection prior to antibody appearance in patients and new borns. Material and Method: A rapid Visual DNA Chip based on RT-Nested PCR and Enzyme-Substrate detection system was developed. At first a specific RT-Nested PCR was developed and the products were confirmed in gel electrophoresis and the products were labeled with DIG (Digoxigenin). The labeled products were then hybridized with the pre-prepared chip with an anchored specific probe. After the washing procedure an antibody against DIG conjugated with alkaline phosphates enzyme was used. After the second washing procedure the BCIP/NBT substrate was used and development of color was interpreted as positive while the negative samples developed no color. Results: 35 sera samples from different stages of HIV infection (AIDS, Asymptomatic and Symptomatic Infection) as well as 20 confirmed negative sera samples were collected and checked with the developed assay. All the positive samples developed reaction while the negative samples had no reaction. Conclusion: In the current study the developed assay showed high sensitivity and specificity to detect HIV-1 infection. It seems that the viral genome could be detected prior to antibody appearance and hence the window period could be shortened. Also the assay could be used to detect infection in new borns from infected mothers, because the maternal antibody could pass the placenta and antibody based assay have false positive results. Because of the high sensitivity, the developed assay could also detect infection in very low viral load conditions.
چکیده فارسی مقاله هدف: ویروس نقص ایمنی اکتسابی نوع یک (HIV-1)، عامل ایجاد کننده نشانگان نقص ایمنی اکتسابی انسانی (AIDS) می‌باشد و تشخیص ژن ویروس HIV-1 در نمونه‌های مشکوک مدرکی جهت تشخیص عفونت است. انتقال بیماری از طریق انتقال خون در دورة پنجره در مراکز انتقال خون، یک معضل جهانی محسوب می‌شود. علاوه بر این، نیاز مبرمی برای تشخیص سریع، حساس و دقیق عفونت HIV-1 قبل از ظهور پادتن در بدن فرد آلوده در بیمارستان¬ها، مراکز بهداشتی و در نوزادان متولد شده از مادران آلوده وجود دارد. مواد و روش¬ها: روش سریع و حـساس تراشه ویـژوال DNAبا کمک RT-Nested PCR و روش و سیستم نشانگر آنزیم- سوبسترا بکار گرفته شد. در ابتدا پس از طراحی و راه¬اندازی روش RT-Nested PCR و اطمینان از به‌دست آمدن محصول مورد نظر، با استفاده از dNTP نشان‌دار شده و با ماده دیگوکسی¬ژنین، روش یاد شده طراحی گردید. محصول به‌دست آمده بر روی تراشه، که از قبل مراحل آماده سازی آن انجام شده و کاوشگر به آن متصل گردیده بود، تحت شرایط هیبریداسیون قرار گرفت. پس از شستشوی تراشه، با آنتی بادی ضد دیگوکسی¬ژنین که با آنزیم آلکالین فسفاتاز، کونژوگه شده بود نزدیک کرده و پس از شستشو، در حضور سوبسترای BCIP/NBT واکنش انجام گرفت. تولید رنگ ارغوانی، نشانه بر مثبت بودن آزمایش و حضور ژن ویروسی در آن نمونه می‌باشد و عدم تغییر رنگ مبنی بر منفی بودن آزمایش است. نتایج: 35 نمونه سرمی از مراحل مختلف عفونت (ایدز، علامت دار و بدون علامت) و 20 نمونه سرمی تأیید شده منفی، جمع‌آوری شد و با روش یاد شده مورد بررسی قرار گرفت. در تمام موارد مثبت رنگ ارغوانی مشاهده گردید، ضمن اینکه در هیچ کدام از موارد منفی رنگی مشاهده نشد. نتیجه‌گیری: در این پژوهش، مشاهده گردید روش طراحی شده، دارای حساسیت و اختصاصیت بالایی برای تشخیص عفونت ویروس HIV-1 می‌باشد. به نظر می‌رسد که ژن ویروسی را می‌توان حتی قبل از تغییرات سرمی و ظهور پادتن تشخیص داد و از این رو می‌توان دوره پنجره‌ای عفونت را کوتاه‌تر کرد. علاوه بر آن در نوزادان متولد شده از مادران آلوده به دلیل انتقال مادری پادتن‌ها روش¬های تشخیص پادتن و سرولوژی فاقد ارزش است و بنابراین از این شیوه می‌توان استفاده نمود. همچنین در این روش به دلیل حساسیت بالا، نمونه‌های سرمی مثبت با بار ویروسی خیلی پایین هم قابل تشخیص است.
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله HIV، RT-Nested PCR، .Visual DNA Chip
کلیدواژه‌های فارسی مقاله HIV، RT-Nested PCR، .Visual DNA Chip
صفحه آغاز مقاله در نشریه ۹
صفحه پایان مقاله در نشریه ۱۶
نشانی اینترنتی
نویسندگان مقاله 92981---92982---92983---92984---92985---
برای برگشت به بخش مقاله‌های منتشر شده اینجا را کلیک كنید.

Health and Biomedical Information System - SEMAT

کلیه حقوق این پایگاه متعلق به معاونت تحقیقات فنآوری وزارت بهداشت،درمان و آموزش پزشکی میباشد.


«اطلاعات اين سايت، قديمی و غيرقابل استناد بوده و صرفا به عنوان آرشيو نگهداری می‌شود.»


Persian site map - English site map - Created in 0.08 seconds with 21 queries by YEKTAWEB 3921